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    光復(fù)新聞

    PBS緩沖液與TBS緩沖液的區(qū)別

    發(fā)布日期:2021/08/24


     PBS緩沖液與TBS緩沖液的區(qū)別


    在生化實驗中,應(yīng)用最為廣泛的緩沖液有PBS緩沖液和用Tris配制的TBS緩沖液。它們的作用都是調(diào)節(jié)反應(yīng)體系的pH值,但又有各自的區(qū)別。近年來,TBS緩沖液的應(yīng)用越來越多,有超過磷酸鹽緩沖液的趨勢。

    PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級解離,緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。


    Tris緩沖鹽溶液簡稱TBS, 屬于常規(guī)pH緩沖液,常用于清洗免疫染色的組織或Western Blot 中的蛋白印跡膜等,是常用的分子生物學(xué)試劑。TBS緩沖液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化鈉、BSA、防腐劑等組成,可用于免疫金銀染色中清洗組織,亦可作為封閉液的基礎(chǔ)試劑。

    PBS磷酸緩沖鹽溶液具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,不僅狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋,比如稀釋血清。原因就是它蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是首選。

    但是PBS緩沖液也不是萬能的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持最佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性。

    但是,在在有金屬離子的溶液體系中,磷酸體系會與常見的Ca離子、Mg離子以及重金屬離子締合生成沉淀。在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中已都使用Tris緩沖液,而很少再用磷酸鹽。
     

    TBS是Tris-HCl緩沖鹽溶液(Tris Buffered,Saline)或緩沖生理鹽水。配制方法是:先以重蒸水少許溶解NaCl(3.5~9g,0.15mol/L),再加0.5mol/L Tris-HCl緩沖液100mL,最后加重蒸水至1000ml,充分搖勻使Tris終濃度為0.05mol/L。TBS常用于免疫酶技術(shù)中漂洗標(biāo)本,通常還搭配去污劑Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚,一種非離子型表面活性劑)一起使用。

     

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